APASL2021：ALG

降低乙肝表面抗原（HBsAg）是实现慢性乙型肝炎功能性治愈的关键一步。此前的研究结果表明，反义寡核苷酸(ASO)能有效降低动物模型和慢性乙型肝炎患者中的HBsAg。然而，肝毒性是反义寡核苷酸(ASO)的一个主要副作用，这种作用在更高活性、更高亲和力的锁核酸(LNA)修饰后作用会更加强烈。

研究人员发现，下一代桥联核酸(BNA)和核酸碱基修饰的单体可以在改善或维持疗效的同时降低肝毒性。因此，研究人员将这些化学物质应用在他们针对乙肝病毒、同时还含有锁核酸(LNA)的反义寡核苷酸(ASO)类药物上，在此基础上开发出了ALG-020572作为治疗慢性乙型肝炎的主要反义寡核苷酸(ASO)候选药物。

研究人员采用标准亚磷酰胺化学法在ABI394和Expedite8909合成器上合成了含锁核酸(LNA)和桥联核酸(BNA)化学成分的反义寡核苷酸(ASO)。采用HBsAg释放法在HepG2.2.15细胞中筛选锁核酸-反义寡核苷酸（LNA-ASOs）。

其次研究人员便是选择有效的含锁核酸(LNA)的反义寡核苷酸(ASO)用N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)进行偶联，并以每周3×10mg/kg的剂量在腺相关病毒(AAV)-HBV小鼠模型中进行测试。在AAV-HBV小鼠模型中，按照内部算法应用BNA翼和碱基间隙修饰，并与其全LNAASO进行比较。

研究结果显示，AligosTherapeutics的反义寡核苷酸(ASO)平台技术通过在翼上链接第三代桥联核酸(BNA)，GAP中使用核苷酸修饰，成功地解决了LNAASO的肝毒性问题。

ALG-020572就是AligosTherapeutics研发出的一款翼中带有桥联核酸(BNA)、GAP使用核苷酸修饰的、靶向小乙肝表面抗原开放阅读框区的HBVASO。针对ALG-020572的研究发现乙肝病毒基因型之间高度同源。转染后的体外EC50值为15.4nM。

在人类ASGPR介导的摄取下，一种ALG-020572类似物在来自FRG小鼠的感染乙型肝炎病毒的原代人肝细胞（PHH）中采用HBsAg分泌试验法测得的EC50值为27nM。在未转染的乙肝病毒感染的仿真3-D肝芯片中，还表现出乙肝表面抗原的降低跟ALG-020572类似物的剂量相关。

在AAV-HBV小鼠模型中，ALG-020572重复给药血清中乙型肝炎表面抗原呈现剂量依赖性降低。与赋形剂对照组相比，以6×10mg/kg剂量重复给药时，HBsAg最大下降量约为1.5log10IU/mL。未观察到ALT升高。

在HepG2.2.15细胞的HBsAg释放试验中，ALG-020579类似物与S抗原转运抑制寡核苷酸聚合物(STOPSTM)化合物ALG-010133具有很强的协同作用。

ALG-020572与靶向于X开放阅读框区域的HBVASO（ALG-020576）联合使用时，在AAV-HBV小鼠模型中表现出叠加效果。

ALG-020572类似物与乙肝病毒核苷类似物恩替卡韦、或衣壳组装调节剂类似物ALG-000184在急性病毒性肝炎-乙型肝炎小鼠模型中显示出叠加作用。

综上数据，研究认为，ALG-020572是一款经过第三代桥联核酸(BNA)和核酸碱基修饰的HBV反义寡核苷酸(ASO)，临床前条件已经获得改善。该化合物可与其他抗乙肝药物有效联合应用。目前ALG-020572正在向临床开发迈进。（更多肝病新药研究信息敬请关注“肝脏时间”微信公众号）！