【期刊导读】T细胞亚群可参与预测PEG IFNα治疗HBeAg阳性初治慢乙肝患者的疗效

编者按：聚乙二醇干扰素α（PEG IFNα）具有抗病毒和免疫调节的双重功能。适应性免疫应答对HBV清除至关重要，反映了PEG IFNα治疗慢性乙型肝炎（CHB）的免疫调节功效，已有多项研究探索了PEG IFNα治疗过程中的免疫机制，但在治疗期间T细胞表面部分重要共抑制分子的动态变化仍需进一步阐明。

程序性细胞死亡蛋白-1（PD-1）作为抑制性受体，在慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者的衰竭T细胞上表达最高；PD-L1是PD-1的配体之一，在HBV感染的肝细胞中表达增加。T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域蛋白-3（TIM-3）在衰竭T细胞表面过表达，可通过促进CD8+ T细胞衰竭而负向调控T细胞应答。HBV感染患者CD4+ CD25+ T细胞的频率显著高于健康者，具有抑制其他T细胞活化的功能。

近期，来自苏州市第五人民医院的朱传武教授团队在International Journal of General Medicine发表成果，探讨了T细胞亚群对PEG IFNα治疗慢乙肝患者疗效的预测价值，结果显示：HBeAg阳性慢乙肝患者经PEG IFNα治疗后CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high抑制性T细胞亚群比例显著下降；CD4+ CD25high T细胞联合基线ALT和HBV DNA可预测PEG IFNα的疗效。

研究方法

纳入2018年在苏州市第五人民医院住院的65例CHB患者，HBeAg阳性，血清HBV DNA > 5 log10 IU/mL，血清ALT升高2 - 10 ULN（ULN为40 IU/L）。在开始PEG IFNα治疗前，所有患者均未接受免疫调节剂治疗以及抗病毒治疗。28例在本院体检的健康者作为对照组。

所有患者均接受PEG IFNα治疗52周，皮下注射，180 μg/QW。若PEG IFNα治疗24周后HBV DNA水平较基线下降< 2 log10 IU/mL，则加用恩替卡韦0.5 mg/d。在PEG IFNα治疗期间，每月检测肝功能和血细胞计数，每3个月检测HBV血清学标志物和HBV DNA。在基线和治疗第52周检测CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T细胞的比例。

在第52周，ALT < 40 IU/L或HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL或HBeAg血清学转换的患者定义为应答者，其余患者定义为无应答者。血清学应答（SR）定义为HBeAg血清学转换。联合应答（CR）定义为治疗结束时（EOT，第52周）HBeAg血清学转换、ALT < 40 IU/L和HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL。

患者特征

治疗第52周，89.2%（58例）患者ALT < 40 IU/L，66.2%（43例）患者HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL（其中3例在第24周加用恩替卡韦治疗），49.2%（32例）患者获得HBeAg血清学转换（SR）。获得SR的患者中有52.3%（34例）获得联合应答（CR）。

CHB组与健康对照组的性别、年龄无统计学差异（P> 0.05）。在T细胞亚群变量中，CHB组与对照组的CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T细胞比例有统计学差异（P< 0.05），CHB组均显著高于对照组（P< 0.05）。

表1：患者特征

研究结果

01 PEG IFNα治疗可降低慢乙肝患者抑制性T细胞亚群比例

在PEG IFNα治疗后，CD8+ PD-1+ T细胞比例略有下降，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T细胞的比例显著降低。CHB组在PEG IFNα治疗前CD8+ PD-1+、CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T细胞比例均显著高于对照组，但治疗结束时这三种T细胞亚群比例降为与对照组无显著差异。

图1：慢乙肝患者与对照组的抑制性T细胞亚群比较

02 ALT < 40 IU/L的慢乙肝患者在治疗52周后部分抑制性T细胞亚群比例显著降低

在ALT < 40 IU/L组，CD8+ PD-1+ T细胞的比例在治疗期间无明显变化，而CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T细胞的比例显著降低。在ALT ≥ 40 IU/L组，三种T细胞亚群的比例在PEG IFNα治疗前后无显著差异。但ALT < 40 IU/L组治疗后CD4+ CD25high T细胞比例显著低于ALT ≥ 40 IU/L组。

图2：PEG IFNα治疗前后，不同ALT水平的慢乙肝患者的抑制性T细胞亚群比较

03 HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL的慢乙肝患者在治疗52周后抑制性T细胞亚群比例显著降低

治疗52周后HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL组的CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T细胞比例显著降低。HBV DNA ≥ 2.7 log10 IU/mL组的三种T细胞亚群比例在治疗前后无显著差异。治疗结束时HBV DNA ≥ 2.7 log10 IU/mL组的CD8+ PD-1+和CD4+ CD25high T细胞比例显著高于HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL组。

图3：PEG IFNα治疗前后，不同HBV DNA水平的 慢乙肝患者抑制性T细胞亚群比较

04 第52周获得HBeAg血清学转换的慢乙肝患者抑制性T细胞亚群比例显著降低

治疗52周后，获得HBeAg血清学转换患者的CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T细胞比例显著降低，且显著低于未获得HBeAg血清学转换的患者。HBeAg血清学转换患者基线CD4+ CD25high T细胞比例显著高于未获得HBeAg血清学转换患者，治疗52周后三种T细胞亚群的比例均显著低于未获得HBeAg血清学转换患者。

图4：PEG IFNα治疗前后， 不同治疗应答人群的抑制性T细胞亚群比较

05 基线ALT、HBV DNA和CD4+ CD25high T细胞构成的模型可预测HBeAg阳性初治慢乙肝患者PEG IFNα治疗的疗效

基线ALT水平与治疗后CD8+ PD-1+和CD4+ CD25high T细胞呈负相关。基线HBV DNA水平与治疗后CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T细胞呈正相关。基线CD4+ CD25high T细胞比例与基线ALT水平呈正相关，与基线HBV DNA，治疗后CD8+ PD-1+和CD8+ Tim-3+ T细胞呈负相关。

图5：经PEG IFNα治疗的慢乙肝患者 抑制性T细胞亚群与临床特征的相关性分析

逐步logistic回归分析表明基线CD4+ CD25high T细胞比例、基线ALT和HBV DNA是预测慢乙肝患者获得SR的独立因素。联合三者构建疗效预测模型，得出若0.028 * ALT + 0.178 * CD4+ CD25high T细胞-1.583 * HBV DNA ≥ -5.13，可预测患者获得SR；若0.006 * ALT + 0.158 * CD4+ CD25high T细胞-1.848 * HBV DNA ≥ -10.256，可预测患者获得CR。由CD4+ CD25high T细胞、基线ALT和HBV DNA构成的预测模型，可很好地预测HBeAg阳性初治慢乙肝患者PEG IFNα治疗的疗效。

图6：预测PEG IFNα治疗获得血清学应答 和联合应答的ROC曲线分析

肝霖君有话说

已有多种生物学标志物可用于预测PEG IFNα治疗慢乙肝患者的疗效（相关链接一，二，三，四）。本研究显示PEG IFNα治疗可降低HBeAg阳性慢乙肝患者CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high抑制性T细胞的比例，由CD4+ CD25high T细胞、基线ALT和HBV DNA构成的最佳模型可用于预测PEG IFNα治疗HBeAg阳性初治慢乙肝患者的疗效。

此外，多项研究对PEG IFNα治疗所涉及的免疫调控机制进行了探索（T细胞、B细胞、NK细胞、DC细胞等）（相关链接一，二，三，四），基于PEG IFNα的治疗策略能临床治愈慢乙肝也得益于其强大的免疫调节能力，因此免疫相关因素可能也可作为疗效预测的良好指标，但临床应用仍有更多的挑战。

参考文献：

Zhu L, Li J, Xu JC, et al. Significance of T-Cell Subsets for Clinical Response to Peginterferon Alfa-2a Therapy in HBeAg-Positive Chronic Hepatitis B Patients [J]. Int J Gen Med, 2022, 15: 4441-4451.