EASL2021：siRNA疗法药物ALG

目前的慢性乙型肝炎(CHB)标准治疗未能降低获得“功能性治愈”所需的HBsAg。HBVsiRNA疗法已被证明能有效降低慢性乙型肝炎患者的HBsAg。在一项项研究中，研究人员对不同的HBVsiRNA序列应用了多种稳定化学方法，包括独特的末端封端，在AAV-HBV小鼠模型血清中测得HBsAg的敲低深度和持续时间方面取得了显著改善。

最终，研究人员选择了ALG-125755，一种利用这些化学物质的siRNA疗法ALG-125903的GalNAc共轭形式，被选择用于进一步开发。在近日举办的欧洲肝病学会年会上，研究人员报告了在细胞核动物模型中测试该药物的研究结果。

在HepG2.2.15细胞（一种常用的基因型DHBV细胞模型），包含整合部分HBV基因组的PLC/PRF/5细胞和原代人类肝细胞(PHH)活HBV感染模型中分析了HBVsiRNA对HBsAg释放的影响。

使用Lipofectamine®RNAiMAX转染未结合的siRNA。对于PHH细胞，在siRNA转染前4天以200MOI(ge)感染HBV。通过ELISA定量检测分泌的HBsAg。在AAV-HBV小鼠模型中，每5天将与GalNAc结合的HBVsiRNA皮下(SC)给药并收集血液，用于HBsAg和ALT评估。

研究结果显示，ALG-125755针对乙型肝炎病毒基因组的一个高度保守的区域，在小乙型肝炎表面抗原开放阅读框中，可以切割4个乙型肝炎病毒转录本，包括2.4kb和2.1kb的乙型肝炎表面抗原编码转录本。测序结果表明，与乙肝病毒基因型A-J的同源性为≥99%。

在HepG2.2.15中，ALG-125903对乙型肝炎表面抗原释放的抑制作用EC50值为24pm。该序列在HBV感染的PHH和PLC/PRF/5细胞中也显示出相似的效力。单次SC剂量为5mg/kg的ALG-125755可使AAV-HBV小鼠血清中HBsAg降低1.5log10IU/mL，比未优化亲本高0.5log10IU/mL。

ALG-125918在另一个HBVsiRNA的反义链上含有一个新的末端帽，在单次SC剂量为5mg/kg后，其最大HBsAg减少率比其亲本提高了0.5log10IU/ml。重要的是，这种修饰显著提高了HBsAg敲除的持久性，在AAV-HBV小鼠中，这种敲除在单剂用药后稳定持续了90天。

综上，多个新型GalNAc偶联HBVsiRNA序列包含独特的优化稳定模式和新型化学物质，在AAV-HBV小鼠模型中显示出显著且持久的HBsAg敲低。其中，已选择ALG-125755进行进一步开发。（更多肝病新药研究信息敬请关注“肝脏时间”微信公众号）！