EASL2021：在研乙肝新药ALG

靶向乙型肝炎病毒(HBV)衣壳组装的步骤是治疗慢性乙型肝炎的有效靶点，Ⅱ类衣壳组装调节剂(CAMs)可诱导HBV核心蛋白(HBc)快速组装成空衣壳，从而抑制HBVRNA的包裹和感染性HBV颗粒的形成。CAM还可以通过阻止病毒DNA从衣壳中的释放来阻断cccDNA的建立。

作为AligosTherapeutics公司推进多种结构多样化衣壳组装调节剂(CAMs)的努力的一部分，公司研究人员在近日举办的欧洲肝病学会年会上报道了ALG-000111，一种新型的II类CAM，在AAV-HBV小鼠模型中具有出色的抗病毒活性和疗效。

采用定量聚合酶链反应(QPCR)检测有无40%人血清的HepG2.117细胞中HBVDNA的抗病毒活性。优化的检测方法被用来评估对几个log的抑制作用以及去除化合物后抗病毒作用的持久性。研究人员还在HBV感染的原代人肝细胞中进行了活性研究，包括对HBVDNA的主要影响和对cccDNA建立的次要影响。使用生化猝灭分析、电子显微镜观察和免疫荧光HBc染色进行进一步的表征。ADME的性质是在体外评估的，而体内的抗病毒效果是在AAV-HBV小鼠模型中评估的。

研究结果显示，ALG-000111及其前药ALG-000286对HepG2.117细胞的HBVDNA产生明显的抑制作用，其EC50值分别为0.88/4.34nM和2.06/9.23nM。优化后的方法可测得EC99/EC99.9值分别为4.81/15.3nM和10.4/39.7nM。加入40%的人血清后，抗病毒活性出现7倍的中度变化。反弹试验显示抗病毒活性有显著的保留，在化合物去除后10天可以观察到强烈的抑制作用。

ALG-000111对乙型肝炎病毒感染的原代肝细胞也有明显的抗病毒活性，对HBVDNA的EC50/EC90值为0.98/3.22nM。此外，cccDNA的形成被阻断，表现为分泌的HBsAg和细胞内的HBVRNA明显减少(EC50/EC90值分别为41.7/651nM和34.0/189nM)。

在生化猝灭实验和电镜下发现ALG-000111诱导空衣壳形成。免疫荧光成像显示有胞浆内HBc聚集的趋势。ALG-000111在SGF/SIF、肝微粒体和肝细胞中稳定。该化合物显示出低CYP450介导的药物相互作用潜力和高透过性的Caco-2单层。前药ALG-000286在AAV-HBV小鼠模型中的评价结果显示，口服30mg/kgBID4周后，HBVDNA明显下降，平均最大下降3.7log10IU/mL。

综上，研究认为，由于ALG-000286在细胞检测和AAV-HBV小鼠模型中具有亚纳摩尔活性和HBVDNA的深度敲除，是一种有前途的II类CAM候选药物，值得进一步开发。（更多肝病新药研究信息敬请关注“肝脏时间”微信公众号）！