乙肝功能性治愈，研究发现RG7834能抑制HBsAg表达！

慢乙肝感染归因于病毒共价闭合环状DNA（cccDNA）在肝内池的维持，该池可作为复制所需的所有病毒基因产物的转录模板。

目前最广泛使用的抗病毒疗法，核苷类似物可有效预防传染性病毒的产生和传播，但对cccDNA或乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）和其他病毒基因的表达无法影响。

在慢乙肝期间，HBsAg大量过量表达，并在小的非感染性脂质囊泡中循环，会干扰宿主的免疫反应。

尽管HBsAg的丢失对现有药物的反应很少见，但HBsAg在临床上与病毒清除率相关。在临床治疗中，除了达到血清转换外，持续降低HBsAg被认为是HBV治疗的重要临床终点，也是与功能治愈相关的关键参数。

为了研究降低HBsAg的机制，今天带来的这项研究通过使用全基因组CRISPR筛选，从而鉴定了HBsAg表达所需的多种宿主因子。并使用这种方法，研究了HBsAg表达的小分子抑制剂（RG7834）的机理。

目前的发现表明该抑制剂通过与TENT4B（PAPD5）和TENT4A（PAPD7）的相互作用而使HBV转录不稳定。这项研究有什么新发现呢？让我们一起看一看。

研究新发现

研究使用全基因组CRISPR筛选，研究鉴定了60种似乎促进或降低HBsAg水平的基因。鉴定了几种具有抗HBsAg活性的泛素化蛋白。UBE2J1，RNF139，UBE2J2和DCAF7的破坏导致HBsAg水平升高。

这表明这些基因可能是通过靶向蛋白质降解方法进行HBsAg治疗性调节的天然底物。

研究还通过筛选鉴定出的HBsAg促表达因子之一的宿主因子ZCCHC14。由于cccDNA基因组的环状重叠特性，HBV RNA加尾显得有所不同。HBV RNA末端冗余基因组转录本（3.5 kb）上的聚腺苷酸化信号（UAUAAA）功能较差，只有在第二次与聚腺苷酸化机制相遇时才能识别出它，而ZCCHC14与TENT4B/A组成的复合物会一起通过促进HBV RNA加尾（非模板添加到RNA的3'末端）来稳定了HBsAg表达。

同时，这项研究显示PRE对ZCCHC14的功能活性也至关重要，并且ZCCHC14在PRE中与TENT4B和SLα物理相互作用。

基于这些数据，研究提出了一个模型，其中ZCCHC14作为非常规TRAMP样复合物的一部分，结合了PRE序列中的HBVSLα。小分子抑制剂RG7834则通过结合TENT4B并抑制其在TENT4A / B-ZCCHC14-PRE复合物中的酶活性，可抑制RNA加尾活性，从而导致HBV RNA不稳定，因此RG7834能抑制HBsAg表达。

研究启示

总之，这项研究表明全基因组CRISPR筛选提供了一种强有力的策略，可用于鉴定控制HBsAg表达的基因和途径。

此外，还证明了这种无偏见的方法能作为剖析HBsAg表达抑制剂潜在机制的工具。

研究也提供了ZCCHC14在通过TENT4A / B作为非常规TRAMP样复合体的一部分通过HBV RNA加尾稳定HBsAg mRNA中的作用的证据，这有可能作为新型降HBsAg的靶标。